Western Blot快速封閉液(1X) ED610使用說明

　　Western Blot快速封閉液(1X) ED610總體效果優于傳統的基于BSA(牛血清白蛋白)、脫脂奶粉、酪蛋白(Casein)等的封閉液及國外同類產品，主要用于Western blot(WB)實驗中PVDF膜或硝酸纖維素膜(nitrocellulose membrane，NC膜)的封閉，也可以用于Western實驗中一抗或二抗的稀釋。封閉液快速。封閉時間通常僅需5-15分鐘，并且和BSA、脫脂奶粉、酪蛋白等傳統的Western封閉液以及國外同類的快速封閉液相比，顯示出更強的信噪比。封閉后背景低且不含血清和白蛋白，確保信噪比。
 

　　Western Blot快速封閉液(1X) ED610使用說明：
 

　　1.完成轉膜后，用Western洗滌液洗滌印跡膜1-2分鐘。
 

　　2.根據膜的大小，在平皿或者其它適當容器中倒入一定體積的封閉液，確保封閉液后續能充分覆蓋膜即可。對于常規的western，一張約6.6×8.5cm的膜推薦使用約10ml左右的封閉液。
 

　　3.用平頭鑷夾住膜的一角，將膜放置在封閉液中，使封閉液*浸沒膜，置于水平搖床上封閉約10分鐘(通常5-15分鐘均可；經多種抗體的測試封閉10分鐘的效果很多時候會顯著優于常規的BSA封閉1小時的效果)。
 

　　4.封閉后的膜即可用于一抗孵育等后續實驗。
 

　　Western Blot快速封閉液(1X) ED610用于PVDF膜及NC膜時的封閉時間為5-15分鐘。對于一些背景非常高的抗體，可以嘗試將封閉時間延長為30-60分鐘。此外，如有特殊需要，也*可以4C封閉過夜。由于沒有任何一種封閉液是適用于所有實驗體系的，因此對于一些特殊的實驗，可能需要根據具體情況考慮使用其它更合適的封閉液。取放PVDF膜和NC膜應使用平頭鑷子，并僅輕輕夾取其邊角，操作過程須避免膜表面產生劃痕、折痕或壓痕等痕跡。PVDF膜一經浸潤和活化，需一直保持濕潤，根據Western進行到的具體步驟可放置于western轉膜液或洗滌液等適當溶液中，否則可能會產生難以封閉的異常背景。